SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳低分子量标准蛋白质宝叶生物

更新时间：2024-02-19

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SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳低分子量标准蛋白质

本公司研制的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳低分子量标准蛋白质，使用方便，效果尤佳。其分子量范围是14400～97400道尔顿。

成分：

成分	分子量（道尔顿）	含量（μg/ 支）
兔磷酸化酶B/Rabit phosphorglase B	97400	40
牛血清白蛋白/Bovine serum Albumin	66200	40
兔肌动蛋白/Rabbit actin	43000	40
牛碳酸酐/Bovine carbonic anhydrase	31000	40
胰蛋白酶抑制剂/Trypsin inhibitor	20100	40
鸡蛋清溶菌酶/Hen egg white lysozyme	14400	40

本产品规格：冻干粉（20次/支）

使用方法：

1、将冻干粉产品先加200ul重蒸水溶解，再加等体积的2倍样品缓冲液混匀。在沸水浴中变性3-5分钟，分装20ul/支，入-20℃保存。使用时取一支即可上样。

2、应经常规 SDS-PAGE电泳后，用考马斯亮蓝R-250或G-250（coomassie blue R-250 or G250）染色。可得分布均匀、密度相同的6个蛋白质条带

3、银染法：将本品以1倍样品缓冲液稀释40-50倍后分装（8ul/支）、-20℃保存。使用前取一支，100℃水浴 3-5分钟即可上样。经常规SDS-PAGE后银染，可得分布均匀的6个蛋白质条带。

建议使用分离胶： 14%（T）。

表 -2倍样品缓冲液配制：

试剂名称	成分	含量/ 浓度	配制方法
2倍样品缓冲液	0.5M Tris-HCI,PH6.8	2.0ml	以上溶液混合后加双蒸水2.5ml至10.0ml，可适当调整溴酚蓝的用量以保证电泳时的*指示
	丙三醇（甘油）	2.0ml
	20%SDS	2.0ml
	0.1%（w/v）溴酚蓝	0.5ml
	2-b-巯基乙醇	1.0ml

Reagents for SDS Gels

A.4×Lower gel buffer pH8.8

1.5M Tris 90.83g

0.4%（w/v）SDS 2.00g

dd H ₂O to 500ml

用浓HC1调PH至8.8

B.4×Upper gel buffer pH6.8

0.5M Tris 12.11g

0.4%（w/v）SDS 0.8g

dd H ₂O to 200ml

用浓HC1调PH至6.8

C.30% Acrylamide regular

29.2%（w/v）acrylamide 29.2g

0.8%（w/v）Bis-acrylamide 0.8g

dd H ₂O to 100ml

加热使acrylamide*溶解，冷却后加Bis混合溶解后定容，用滤纸过滤，装棕色瓶

D.10×Running buffer

0.25M Tris 30.3g

1.92M Gly 144.1g

1.0%（w/v）SDS 10.0g

dd H ₂O to 100ml

（无需调PH）PH即为8.2-8.3

分离胶总体积12ml 单位：ml 浓缩胶

附图一：SDS-PAGE 低分子量标准蛋白质考马斯亮蓝R-250染色结果

兔磷酸化酶B 97400道尔顿

牛血清白蛋白 66200道尔顿

兔肌动蛋白 43000道尔顿

牛碳酸酐 31000道尔顿

胰蛋白酶抑制剂 20100道尔顿

鸡蛋清溶菌 14400道尔顿

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳低分子量标准蛋白质 宝叶生物