Superoxide Dismutase Assay Kit 试剂

Superoxide Dismutase Assay Kit 试剂

SOD 检测试剂盒用于测定超氧化物歧化酶（SOD）的抑制活性。

原理：超氧化物歧化酶（SOD）是最重要的抗氧化酶之一，可催化超氧阴离子（O₂⁻）发生歧化反应，生成H₂O₂与分子氧。为测定 SOD 活性，现已开发出多种直接与间接检测方法。其中，基于硝基蓝四氮唑（NBT）的间接检测法因操作简便，应用较为广泛。但 NBT 法存在若干缺陷，例如甲臜染料水溶性差，且会与XO / XOD还原态发生相互作用。K‑ASSAY  SOD 检测试剂盒采用 KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY 的高水溶性四氮唑盐 WST‑1（2‑(4‑碘苯基)‑3‑(4‑硝基苯基)‑5‑(2,4‑二磺苯基)‑2H‑四氮唑单钠盐），可在被超氧阴离子还原后生成水溶性甲臜染料，实现便捷的 SOD 检测。如图 1 所示，超氧阴离子的还原速率与XO / XOD活性呈线性关系，且该还原过程会被 SOD 抑制。因此，可通过比色法测定 IC₅₀（SOD 或类 SOD 物质的 50% 抑制活性）。

图 1 SOD 测定原理

Superoxide Dismutase Assay Kit 试剂

1. 向各样品孔与空白组 2 孔中加入 20 μL 样品溶液，向各空白组 1 孔与空白组 3 孔中加入 20 μL 双蒸水（ddH₂O）。

2. 向每孔加入 200 μL WST 工作液，混匀。

3. 向空白组 2 孔与空白组 3 孔中加入 20 μL 稀释缓冲液。

4. 向各样品孔与空白组 1 孔中加入 20 μL 酶工作液，随后充分混匀 **。

5. 将酶标板置于 37 ℃条件下孵育 20 分钟。

6. 使用酶标仪读取 450 nm 处吸光度值。

7. 使用下述公式计算 SOD 活性（抑制率 %）。

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